乳酸菌发酵---预防噬菌体污染

2008-05-13 16:58 来源: http://bbs.bio668.com 作者:jianfeng-zh 网友评论 条 浏览次数 37 转入论坛浏览
                乳酸菌发酵---预防噬菌体污染

      在发酵过程中经常因噬菌体侵袭乳酸菌,致使菌体产酸能力严重下降乃至菌体破裂而致使发酵迟缓或发酵失败,给生产厂家造成巨大的经济损失。发酵工厂预防噬菌体污染时一般考虑以下两点:其一是菌体自带噬菌体(特别是溶源性细菌);其一是生产环境和自然条件中存在的噬菌体。
      菌株要求:人们己通过丝裂霉素C诱导和紫外线照射,成功地将溶原性细菌内的噬菌体基因表达、复制、装配并释放出完整的温和噬菌体,并证明了一些温和型噬菌体与烈性噬菌体具有同源性。为防止溶原性细菌裂解释放噬菌体给发酵工收带来的严重威胁,生产中常准备多种对付小同噬菌体的抗性菌株,必要时还可以及时更换或交替使用发酵剂来抵制此类污染日前乳酸菌中许多耐噬菌体质粒己经得到鉴定,并在3个主要领域显示了它的作用:阻碍吸附(阻碍噬菌体对菌体细胞的入侵)、限制变性(易受噬菌体污染的DNA的酶遭破坏)、吸收感染(阻止寄主体内成熟噬菌体粒了的发展形成)。需要注意的是,选育的抗噬菌体菌株必须在发酵速度、产香和产粘等特性方面与母株相似;同时抗噬菌体基因应具有广谱机制,而并非只对单个菌株有效。
    笔者曾有机会接触过菌株自带噬菌体的情形,在种子罐中并没有表现出来,后来进入发酵罐后,初期菌浓度还增加,后来停止,再后来反而减少,(根据培养的经验知道养份没有被正常消耗)最后几乎没有菌浓。由于开始经验不足,首先判断是染菌,后来才判断出是噬菌体。最终通过取样验证分析得知是菌株自带噬菌体。事后话了好大精力处理噬菌体污染问题。(包括使用过的设备和环境还有菌种本身等) 即使是用于表达的大肠杆菌,也有 带入噬菌体。所以操作时每个环节都要注意到防止污染的问题。
    环境要求:因乳品厂生产设备一般是半开放式的,有时甚至为连续的生产模式,有必要建立因地制宜的清洁卫生和灭菌消毒制度。如严禁发酵废物(洗罐水和种了剩余培养物等)未经高温处理而排放;实行严格的定期灭菌,并定期监测发酵罐、管道及周围环境中噬菌体的数量变化;注意培养原料的选择,对可能是污染源的鲜乳应进行85度/20 min的热处理;此外噬菌体对乳品发酵剂的侵染依赖于培养基中的游离钙离了的存在。对此可通过制备去钙脱脂乳培养基,或在培养基中加入磷酸欲来有效防止扩大噬菌体污染的范围。

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